Анастасия кириллова в контакте: Белорусская лыжница Анастасия Кириллова выиграла два золота на этапе Кубка Восточной Европы

Содержание

Белорусская лыжница Анастасия Кириллова выиграла два золота на этапе Кубка Восточной Европы

Анастасия Кириллова. Фото из архива

13 ноября, Минск /Корр. БЕЛТА/. Белорусская лыжница Анастасия Кириллова выиграла два золота на первом в сезоне этапе Кубка Восточной Европы, который прошел под эгидой Международной федерации лыжного спорта (FIS) в Казахстане, сообщает корреспондент БЕЛТА.

Первое золото спортсменка выиграла в спринте классическим стилем.

Показав лучший результат в квалификации, она и в основном раунде была неудержима, опередив россиянок Евгению Шаповалову и Христину Мацокину. Они заняли соответственно второе и третье места в итоговом протоколе.

В гонке классическим стилем на 5 км Анастасия Кириллова пришла к финишу с результатом 14 мин. 40,4 сек. Основными соперницами белоруски стали также российские лыжницы. Дарья Рогозина уступила Кирилловой на финише 0,5 сек., ставшая бронзовой медалисткой Наталья Баракина уступила 2,4 сек. -0-

Олимпийские игры (ОИ-2022), Пекин (Китай), командный спринт (полуфинал A), женщины

Онлайн результаты

Официальный сайт Международной федерации лыжного спорта (FIS) опубликовал результаты женской гонки, прошедшей в рамках Олимпиады-2022. Прямая трансляция лыжного соперничества сильнейших гонщиц планеты из Пекина состоялась в среду, 16 февраля. Представляем итоговую онлайн таблицу и подробный протокол соревнований китайского глобального турнира.

Место	№	Имя лыжницы	Результат
1	4	GERMANY HENNIG Katharina CARL Victoria	23:02.08
2	1	USA BRENNAN Rosie DIGGINS Jessie	+4.03
3	5	AUSTRIA STADLOBER Teresa UNTERWEGER Lisa	+6.26
4	2	SWITZERLAND VAN DER GRAAFF Laurien FAEHNDRICH Nadine	+28.78
5	7	P.R. CHINA CHI Chunxue LI Xin	+41.85
6	6	CANADA STEWART-JONES Katherine BEATTY Dahria	+1:01.64
7	3	SLOVENIA UREVC Eva LAMPIC Anamarija	+1:08. 06
8	11	AUSTRALIA YEATON Jessica WRIGHT Casey	+2:11.34
9	8	UKRAINE KROL Yuliia ANTSYBOR Maryna	+2:43.96
10	10	CROATIA HADZIC Tena MALEC Vedrana	+3:27.15
11	13	LATVIA AUZINA Kitija VOLFA Estere	+3:44.18
Сняты за отставание на круг от лидера
12	12	TURKEY DUMAN Aysenur DURSUN Ozlem Ceren	&nbsp
Не стартовали
	9	BELARUS KIRILLOVA Anastasia KARALIOVA Hanna	&nbsp

Анастасия Романовна Кириллова | репетитор на profi.ru (математика, физика, информатика, программирование, C++, Python, ЕГЭ, ОГЭ).

Сначала новыеСначала новыеСначала хорошиеСначала плохие

Михаил

Пять с плюсом

12 февраля 2022

Физика

Анастасия очень помогла дочери понять физику в рамках школьной программы 8 класса. Сейчас дочь говорит, что физика это просто!
Большое спасибо Анастасии!

Елизавета

25 января 2022

Физика

Спасибо большое девушке, за три дня подготовила на 4 к экзамену в вузе по физике.

Владислав

23 января 2022

Физика

Очень хороший преподаватель, искал, чтобы подготовиться к экзамену на втором курсе. Мы решали очень сложные задачи, все было очень доступно и понятно. Рекомендую!

Екатерина

Пять с плюсом

18 января 2022

Python

Всё очень понравилось. Специалист шикарный, помогла сдать программирование в вузе на 5, за 4 занятия, более того, сдавалось в результате очень легко, благодаря подготовке с Анастасией.

Дарья

Пять с плюсом

30 ноября 2021

Математика

После первого занятия с Настей я сразу поняла, что это тот преподаватель, которого я так долго искала и не могла найти. Настя очень контактная, знает как найти подход, умеет обьяснить чуть ли не на пальцах таким «асам» в математике как я, делает это пока не увидит, что я результат достигнут! Короче, Настенька, спасибо тебе огромное за твой труд!! Ты Большая Молодец! Благодарю безмерно! С твоей помощью я теперь совсем не профан, как я думала раньше)

Каролина

Пять с плюсом

14 сентября 2021

Физика

Прекрасный преподаватель)))) За короткие сроки помогла разобрать задачи повышенной сложности по физике и математике. Всё объяснила понятным, доступным языком.

Ксения

Пять с плюсом

28 августа 2021

Физика•ДВИ по физике

Замечательный преподаватель. Всё понятно объясняет с первого раза😌 Легко находит общий язык с учениками и всегда на позитиве)
Помогала подготовиться к вступительным экзаменам по физике и математике в ВУЗы.
В результате трёхмесячной подготовки они были сданы хорошо и я смогла поступить в ВУЗ, который хотела😄 Задания на вступительных попались по типу ЕГЭ.

Александра

Пять с плюсом

9 июля 2021

ЕГЭ по физике

Хочу поблагодарить Анастасию Романовну за квалифицированную помощь в освоении сложного материала по физике! Сначала боялись ЕГЭ из-за пробелов в знаниях и психологического неприятия, а после занятий все стало очень понятно и без отторжения.
Репетитор не только помогал разобраться с задачами, но и поддерживал морально, это именно то, что нам было нужно! Высокий балл, полученный на ЕГЭ позволяет нам поступить на бюджет в выбранный ВУЗ.
Ещё раз спасибо за вашу поддержку и ваш труд! Будем вас рекомендовать родственникам (и по ЕГЭ, и по ОГЭ), очень понравилось сотрудничать с таким специалистом!

Светлана

1 июня 2021

Python

Анастасия наш незаменимый помощник! Ребенок вдруг в 7ом классе решил поступать в IT профиль в 8ого класса. Анастасия помогла приобрести уверенность в Pyton, дала нужный материал в понятной и доступной форме, научила читать задание внимательно и думать логически! Это дорогого стоит. После занятий дочь только убедилась, что это самое интересное направление из всех в школе, старалась поступить и достигла цели. Это хороший жизненный урок )
Думаю, что мы не единожды обратимся к Анастасии со сложностями и трудностями 😉

Илья

Пять с плюсом

13 апреля 2021

Физика

Преподаватель проявляет интерес к ученику, результат занятий заметен сразу — физика 10 класс.
Очень понравилась в приватном общении…

Каждый отзыв перед публикацией проходит проверку на неподдельность. Анонимные сообщения не рассматриваются. Тексты не редактируются и не фильтруются — все прошедшие проверку публикуются «как есть».

Фолликулярные волны в онтогенезе и женской фертильности

doi: 10.1016/j.biosystems.2021.104558. Epub 2021 5 октября.

Принадлежности Расширять

Принадлежности

¹ Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. И. Кулакова, Минздрава России, Москва, Россия. Электронный адрес: [email protected].
² Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова Минздрава России, Москва, Россия.
³ Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия.

Элемент в буфере обмена

Анастасия Кириллова и др.Биосистемы. 2021 дек.

Показать детали Показать варианты

Показать варианты

Формат АннотацияPubMedPMID

дои: 10.

1016/j.biosystems.2021.104558. Epub 2021 5 октября.

Принадлежности

¹

Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова Минздрава России, Москва, Россия.Электронный адрес: [email protected].
² Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова Минздрава России, Москва, Россия.
³ Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия.

Элемент в буфере обмена

Полнотекстовые ссылки Параметры отображения цитирования

Показать варианты

Формат АннотацияPubMedPMID

Абстрактный

Рост и рекрутирование антральных фолликулов являются основой женской репродукции.

Теория фолликулярных волн объясняет рекрутирование, рост и отбор антральных фолликулов. Эта статья посвящена фолликулярной волне женской репродукции на протяжении всей жизни. Мы подчеркиваем прогресс в понимании ритмических изменений фолликулов на основе клинических исследований и исследований на животных моделях. Мы рассматриваем картину фолликулярной волны до полового созревания, во время беременности и в перименопаузе. Известно несколько математических моделей, достаточно точно описывающих динамику фолликулярных волн.Теория фолликулярных волн позволяет реализовать новые подходы к стимуляции яичников. Стимуляция в лютеиновой фазе и двойная стимуляция в настоящее время более широко используются для сохранения фертильности у онкологических больных и для увеличения шансов на успех программ ЭКО у пациентов с плохой реакцией.

Ключевые слова: Дуэт стим; фолликулярные волны; фолликулогенез; Лютеиновая фаза; Менструальный цикл; яичник.

Деформация зародышевого слоя и формирование оси в агрегатах эмбриональных клеток морских анемонов

Эмбриональное развитие животных можно рассматривать как устойчивую серию морфогенетических событий, запускаемых и контролируемых действием регуляторных молекул и физическими характеристиками клеток и тканей. Эти морфогенетические события образуют траекторию развития, позволяющую сформировать определенный план тела. Поразительно, что специфический для данного типа план тела может быть достигнут различными траекториями развития. Например, у хордовых радиальное голобластическое дробление бедных желтком яиц головохордовых Branchiostoma приводит к образованию полой целобластулы, которая гаструлирует путем инвагинации. Напротив, дискоидальное дробление птичьего яйца приводит к образованию дискобластулы, лежащей поверх желтка и гаструлирующей за счет ингрессии одиночных клеток через первичную полоску (1).Несмотря на это, обе траектории развития ведут к формированию типичного плана строения хордовых. Точно так же среди различных кишечнополостных можно обнаружить практически все известные способы гаструляции (2). В то время как инвагинация преобладает среди антозоев и сцифозоев, гидрозои гаструлируют путем униполярной или мультиполярной ингрессии, деламинации или эпиболии. Тем не менее, после гаструляции все книдарии (за исключением нескольких прямых разработчиков) образуют типичную личинку-планулу. Как такие различия в развитии развивались и как они могли способствовать формированию различных планов тела, остаются открытыми вопросами в биологии.

Большое количество экспериментальных данных указывает на то, что спектр способностей к дифференцировке и клеточному поведению в эмбриональных клетках шире, чем их предполагаемая судьба и фактическое поведение во время нормального развития (3⇓⇓⇓–7). Крайний случай пластичности развития наблюдается у животных, способных развиваться из скопления диссоциированных и реагрегированных клеток, когда первоначальный план тела разрушается, а затем восстанавливается de novo путем самоорганизации (8⇓⇓–11). Мы пришли к выводу, что новые траектории развития могут развиваться, когда клетки, способные к регуляции развития, реагируют на новые физические ограничения, такие как увеличение количества желтка в вышеупомянутом примере.Поэтому мы предположили, что новые траектории развития могут также использоваться, если эмбриональные клетки сталкиваются с новым контекстом в экспериментальной ситуации. Чтобы проверить степень регулирующей способности эмбриональных клеток, мы провели эксперименты по диссоциации-реагрегации с эмбрионами морского анемона Nematostella vectensis . В этом исследовании мы используем комбинацию микрохирургии и анализов трансгенных репортерных генов для оценки потенциала развития различных эмбриональных клеток, происходящих из диссоциированных гаструл Nematostella , и анализа процесса реформирования осей тела и зародышевых слоев.

Результаты и обсуждение

Nematostella представляет собой книдариальную модельную систему, поддающуюся функциональным исследованиям в эмбриогенезе. После оплодотворения эмбрион Nematostella развивается в полую бластулу, которая затем гаструлирует путем инвагинации, формирует личинку плавающей планулы и метаморфозирует в первичный полип (12). Недавние эксперименты по трансплантации показали, что губа бластопора гаструлы Nematostella обладает способностью индуцировать ось, передаваемой Wnt1 и Wnt3 , сходной с бластопоральным осевым организатором позвоночных (13, 14). Чтобы оценить потенциал развития различных эмбриональных клеток, мы диссоциировали Nematostella midgastrulae на стадии, когда энтодерма только начинает инвагинировать, на одиночные клетки или небольшие кластеры из двух-девяти клеток [∼80 и ∼20% соответственно (рис. .S1 A )] и реагрегировали их центрифугированием (рис. 1 A ). Сразу после центрифугирования в агрегатах отсутствовали какие-либо признаки осевой полярности или сегрегации зародышевого слоя как на морфологическом (рис. 1 B и C ), так и на молекулярном (рис.S2 A – T ) уровень. Полнота диссоциации и последующие морфологические наблюдения были подтверждены анализом гибридизации in situ оральных маркеров Wnt1 , Wnt3 , Wnt4 , Bra и FoxA , маркера среднего тела Wnt2 , FGFa1 , энтодермальный маркер SnailA и маркеры направляющей оси BMP2/4 и Chordin через 30 мин после диссоциации (mpd, т. е., сразу после реагрегации) до 6 дней после диссоциации (dpd) (рис. S2). Слои эктодермальных и энтодермальных клеток начали разделяться на несколько независимых областей через 6-12 часов после диссоциации (hpd) (Fig. 1 D и E ). Первым формировался эктодермальный клеточный слой, а энтодерма оставалась неэпителизированной. К 24 часам в сутки сегрегация зародышевого слоя была завершена (рис. 1 F и G ), а энтодермальный маркер snailA экспрессировался исключительно во внутреннем слое агрегатов (рис.S2 В ′). На этом же этапе мы наблюдали первые признаки формирования рта (рис. 1 H ). Начиная со 2-х суток после диссоциации, агрегаты были наиболее похожи на планулы: их эктодерма развивала реснички, агрегаты активно плавали. Интересно, что более крупные агрегаты выглядели так, как будто они были построены из нескольких сросшихся планул. Формирование рта и глотки продолжалось в течение следующих 2 сут (рис. 1 I – K ), а к 6 суткам развились гипостомы (ротовые конусы) (рис. 1 L ). Формирование щупалец завершалось к 7–10 суткам (рис. 1 M ). В зависимости от размера агрегата образовывались одно или несколько ротовых отверстий. Чтобы отслеживать формирование орально-аборальных осей в агрегатах, мы провели двойную гибридизацию in situ с маркером орального полюса FoxA и маркером аборального полюса FGFa1 (15) (рис. 1 N ). Интересно, что количество пятен, экспрессирующих FoxA , превышает количество пятен, экспрессирующих FGFa1 , примерно в 3 раза (в среднем: 2.98; 95% доверительный интервал: 2,69–3,27; медиана: 3,0; н = 60). Крупные агрегаты всегда образовывали несколько голов с разным количеством щупалец (рис. 1 O – S ). В отличие от агрегатов взрослого пресноводного полипа Hydra (16), ротовые отверстия часто располагались очень близко друг к другу (рис. 1 S и T ), что свидетельствует о том, что латеральное торможение не столь выражено, как у Hydra. .

Рис. 1.

Ход развития агрегата.( A ) Схема эксперимента диссоциации-реагрегации. ( B – M ) Последовательные стадии развития агрегатов проанализированы с помощью конфокальной и сканирующей электронной микроскопии. Непосредственно после центрифугирования эпителия не наблюдается ( В и С ). Эпителизация эктодермы начинается на 12 часах в день ( D и E : обратите внимание на участок эпителизированной эктодермы вдоль пунктирной линии между белыми стрелками на D ) и завершается на 24 часах на день ( F : продольный оптический срез; G). : поперечный оптический срез).Становятся видны первые признаки формирования рта ( F и H ). Энтодерма начинает формировать эпителиальный слой на 48 часах в день ( I ) и завершает процесс на 3 днях на день ( J : обратите внимание также на хорошо развитую глотку). Рот, гипостома и щупальца формируются в течение следующих нескольких дней ( K – M ). Черный прямоугольник ( K , пунктирная линия) маскирует исходную масштабную линейку. ( N – T ) Более крупные агрегаты образуют несколько головок. ( N ) Двойная гибридизация in situ с оральным маркером FoxA (красный) и аборальным маркером FGFa1 (синий) показывает, что отношение количества голов/количества аборальных полюсов составляет 3/1.СЭМ показывает, что количество голов на агрегат и щупалец на голову может варьироваться ( O – S ). Структуры головы могут образовываться в непосредственной близости друг от друга, что визуализируется с помощью СЭМ на стадии полипа и с помощью гибридизации in situ с оральным маркером Brachyury на более ранней стадии ( S и T ). ( B – G , I и J ) Красный: ядра; зеленый: F-актин. Звездочки, рот; dpd, дни после диссоциации; экто, эктодерма; эндо, энтодерма; hpd, часы после диссоциации; mpd, минуты после диссоциации. (Шкала: 100 мкм.)

Эксперименты, описанные выше, демонстрируют, что диссоциированная ткань гаструлы Nematostella способна восстанавливать нормальный план тела в агрегатах. Затем мы хотели узнать, ограничена ли способность к самоорганизации определенными частями эмбриона. С этой целью мы генерировали агрегаты только из диссоциированных оральных или аборальных половинок. Мы обнаружили, что оральные половинки были способны восстанавливать оси тела, и в конечном итоге они превратились в нормальные полипы (рис.2 А – Е ). Напротив, аборальные агрегаты образовывали реснитчатые шары без каких-либо признаков осевого паттерна, содержащие тонкий поверхностный эпителиальный слой и многочисленные мелкие неэпителизированные клетки внутри (рис. 2 F – J ). Недавно мы показали, что способность индуцировать эктопические оси тела в экспериментах по трансплантации, т. е. способность осевого организатора, ограничивается узкой областью изгиба губы бластопора гаструлы Nematostella (13). Чтобы оценить, сколько клеток-организаторов требуется для инициации формирования оси в агрегатах, мы определили приблизительное количество клеток в средней части гаструлы во время диссоциации (медиана: 6934; рис. S1 B ) и количество клеток в один ряд изгиба губы бластопора (медиана: 107; рис. S1 C ). Затем мы диссоциировали и реагрегировали 100 половин аборальной средней гаструлы вместе с 2, 5 или 10 половинами оральной гаструлы, соответственно, создавая 1/50, 1/20 и 1/10 разведения половин оральной гаструлы половинками аборальной гаструлы.Это соответствует примерно 1/1550, 1/620 и 1/310 соотношению клеток-организаторов к аборальным полуклеткам (по сравнению с соотношением 1/31 при диссоциации полных гаструл). Во всех агрегатах, состоящих из 1 оральной половины на 50 аборальных половинок, мы наблюдали образование реснитчатых шариков без каких-либо признаков осей тела, 28 % образования головы в агрегатах, состоящих из 1 оральной половинки на 20 аборальных половинок, и 58 % образования головы в агрегатах, состоящих из из 1 оральной на 10 аборальных половинок (рис. S1 D ).

Рис. 2.

Различия в способности клеток гаструлы к формированию осей и спецификации клеточных судеб в агрегатах. ( A – E ) Агрегаты ротовых половинок гаструл развиваются в полипы. ( F – J ) Агрегаты из аборальных половинок гаструл развиваются в реснитчатые шарики. ( J ) Конфокальная визуализация показывает, что снаружи они имеют эктодермальный эпителиальный слой, а внутри заполнены многочисленными мелкими клетками. ( K – N ) В агрегатах, состоящих из оральных половинок гаструл дикого типа и аборальных половинок гаструл, повсеместно экспрессирующих lifeact-mOrange2, светящиеся клетки рассеяны по всему агрегату и могут наблюдаться как в аборальном, так и в оральном положении гаструлы. полип (желтые стрелки N ).( O – R ) В агрегатах, состоящих из эктодермы гаструл дикого типа и энтодермы гаструл, повсеместно экспрессирующих lifeact-mOrange2, флуоресцентные клетки мигрируют в энтодерму. ( S – V ) В агрегатах, состоящих из аборальной эктодермы гаструл дикого типа и энтодермы гаструл, повсеместно экспрессирующих lifeact-mOrange2, флуоресцентные клетки мигрируют в энтодерму, хотя клетки-организаторы отсутствуют. ( W – Z ) В агрегатах, состоящих только из энтодермальных клеток, клетки становятся мезенхимальными и мигрируют из агрегата.( A’ — E’ ) Сразу после центрифугирования mCherry не экспрессируется в агрегатах, состоящих из аборальной эктодермы endoRed гаструл и эктодермы губ бластопора гаструл дикого типа ( B’ ). Экспрессия mCherry, управляемая эндодермальным промотором, начинает обнаруживаться во внутренних клетках агрегата с 28 hpd (желтые стрелки в C’ ). Затем в энтодерме формирующихся полипов наблюдаются светящиеся клетки ( E’ ). ( F’ – J’ ) В агрегатах, состоящих из ротовых половинок endoRed гаструл, mCherry непрерывно экспрессируется в энтодермальных клетках. Размер выборки> 30 в каждом эксперименте. dpd, дни после диссоциации; eR, эндоред; hpd, часы после диссоциации; mOr, lifeact-mOrange2; mpd, минуты после диссоциации; вес, дикий тип. Черные полосы на гаструлах обозначают положение разреза. (Шкала баров: J , 15 мкм; все остальные, 100 мкм.)

Чтобы выяснить, сохраняют ли аборальные клетки память о своем исходном осевом положении после диссоциации или принимают новую судьбу в соответствии со своим новым положением, мы создали трансгенная линия, повсеместно экспрессирующая флуоресцентный актин-связывающий белок lifeact-mOrange2, управляемый промотором EF1α (17⇓–19) (фиг.S3 А – С ). Затем мы получили смешанные агрегаты из половинок аборальной гаструлы, экспрессирующих lifeact-mOrange2, с половинками нетрансгенной оральной гаструлы (Fig. 2 K ). Мы обнаружили, что флуоресцентные клетки рассредоточились по всем полученным полипам, включая их самые оральные области, что указывает на то, что осевая идентичность была перепрограммирована в этих изначально аборальных клетках, чтобы принять оральную идентичность (рис. 2 K — N и 3). .

Рис. 3.

Краткая информация о судьбе клеток при нормальном развитии ( А ) и в агрегатах ( В ).

Удивительно, но в этом эксперименте мы обнаружили некоторые флуоресцентные трансгенные клетки внутри агрегатов (рис. S4 A – D ), хотя все трансгенные клетки lifeact-mOrange2 происходили из аборальных половинок гаструлы, т.е. предполагаемой эктодермы. Поэтому мы хотели более тщательно проверить, сохраняют ли клетки в совокупности свою первоначальную идентичность зародышевого слоя. В этом отношении можно предположить два сценария: ( i ) либо эмбриональные клетки сортируются в соответствии со своей исходной идентичностью зародышевого листка, как показано у амфибий (20), либо ( ii ) они теряют информацию о своем первоначальном зародыше. идентичности зародышевого листка и приобретают ее de novo в ходе агрегатного развития.Мы вырезали флуоресцентные преэнтодермальные пластинки из эмбрионов lifeact-mOrange2, используя микрохирургическую технику (рис. 2 O ). Затем мы диссоциировали эти фрагменты вместе с нетрансгенными эктодермальными клетками. Мы наблюдали, что в течение первых 18 ч развития агрегата все флуоресцентно меченные клетки мигрировали внутрь агрегата (рис. 2 O – R и фильм S1). Таким образом, мы делаем вывод, что энтодермальные клетки «помнят» свою первоначальную судьбу и способны рассортировываться, образуя внутренний слой агрегата (рис.3). Интересно, что сигнал, необходимый для индивидуальной ингрессии энтодермальных клеток, не исходит от клеток-организаторов губы бластопора, поскольку ингрессия энтодермальных клеток также происходила в агрегатах, состоящих из EF1a::lifeact-mOrange2 энтодермы и аборальной эктодермы. гаструл дикого типа (рис. 2 S – V ). Подобно аборальным полуагрегатам (рис. 2 G – J ), такие агрегаты развивались в компактные шарики с эктодермальным слоем и массой клеток внутри (рис.2 S – V ). Чтобы проверить, способны ли энтодермальные клетки сами по себе образовывать агрегаты и развиваться в полипы, мы создали агрегаты из хирургически изолированных преэнтодермальных пластин (Fig. 2 W ). Поразительно, но без эктодермы, образующей эпителий на поверхности агрегата, энтодермальные клетки стали мезенхимальными и диспергированы. При 3,5 часах в сутки на краю агрегата можно было наблюдать клетки, образующие филоподии. К 12 часам в сутки весь агрегат превратился в жизнеспособные, подвижные мезенхимальные клетки, распластавшиеся по поверхности чашки, не сумев развиться и сформировать полип (рис.2 Вт – Z ). Таким образом, одна энтодерма не может компенсировать отсутствие эктодермы.

Затем мы провели реципрокный опыт, т. е. формирование агрегатов, состоящих только из эктодермальных клеток. Если эктодермальные клетки способны превращаться в энтодерму, мы ожидаем, что они будут расположены во внутреннем слое и, что важно, начнут экспрессировать специфичные для энтодермы маркерные гены. Чтобы отслеживать это преобразование, мы создали трансгенную линию, названную endoRed, экспрессирующую mCherry исключительно в энтодерме под контролем регуляторной области гена SnailA , который кодирует энтодермально экспрессируемый транскрипционный фактор цинкового пальца (рис. S3 D – F ) (21). С помощью микрохирургии мы выделили аборальные половины гаструл потомков endoRed, содержащих только эктодермальные клетки. Поскольку агрегаты из аборальных полушарий не могут развиться в первичные полипы (рис. 2 F – J ), мы диссоциировали их вместе с фрагментами губ бластопора гаструл дикого типа (рис. 2 A’ ). Мы исключили возможность контаминации аборальных половин эмбрионов-потомков endoRed экспрессирующими mCherry клетками преэнтодермальной пластинки (рис.2 Б’ ; подробности см. в SI Materials and Methods ), а затем проследили развитие аборальных агрегатов губ эндокрасного/дикого типа, где после реагрегации не было обнаружено ни одной флуоресцентной клетки. Т.о., любые mCherry-экспрессирующие клетки, появляющиеся по мере развития агрегатов, должны происходить из аборальной эктодермы линии endoRed. Через 1 день мы обнаружили внутри агрегатов первые клетки, экспрессирующие специфический для энтодермы трансген (рис. 2 C ‘).Эти клетки сохранялись на протяжении всего развития, и в конце концов образовались первичные полипы с флуоресцентными пятнами в энтодерме (Fig. 2 D’ и E’ ). Для сравнения, контрольные агрегаты, состоящие из оральных половинок endoRed гаструл, флуоресцировали с самого начала (рис. 2 F’ — J’ ). Следовательно, мы заключаем, что эктодермальные клетки эмбрионов endoRed могли вносить вклад в энтодерму полипа (рис. 3). Чтобы проверить, будет ли присутствие энтодермальных клеток дикого типа препятствовать тому, чтобы клетки аборальной эктодермы приняли энтодермальную судьбу, мы диссоциировали аборальные половины endoRed гаструл вместе с целыми ротовыми половинами гаструл дикого типа, включая нетрансгенные энтодермальные клетки.Примечательно, что мы обнаружили, что присутствие нетрансгенной энтодермы не препятствует некоторым аборальным эктодермальным endoRed клеткам, расположенным внутри этих агрегатов, принимать энтодермальную судьбу (Fig. S4 E — H ). Интересно, что даже в отсутствие оральных клеток единичные клетки, экспрессирующие mCherry, были временно обнаружены в аборальных эктодермальных агрегатах, но эта экспрессия исчезала, когда агрегаты останавливались на стадии ресничного шарика (рис. S4 I – L ). .Это говорит о том, что внутреннего расположения может быть достаточно, чтобы инициировать экспрессию энтодермальных маркерных генов в аборальных эктодермальных клетках, однако эта экспрессия должна поддерживаться сигналами, исходящими от клеток губы бластопора.

Приведенный выше результат поднимает вопрос, какие сигналы, исходящие от бластопоральных клеток, могут индуцировать и поддерживать формирование оси и зародышевого листка? Поскольку энтодермальные клетки были способны к автономной сортировке в отсутствие формирующих ось сигналов (рис.2 S – V ), мы пришли к выводу, что формирование осей имеет центральное значение для развития агрегатов. Поэтому мы сосредоточились на роли передачи сигналов Wnt/β-катенина и передачи сигналов BMP, поскольку сигнальные молекулы этих путей экспрессируются в бластопоре, и ранее было показано, что они играют роль в формировании оси у Nematostella (13, 22). ⇓⇓⇓–26).

Нокдаун β-catenin приводит к отсутствию орально-аборальной оси и образованию энтодермы (22, 23).Во время нормального развития первоначальный сигнал β-катенина, скорее всего, основан на депонированных материнским молекулам (13, 27), в то время как зиготическая экспрессия генов Wnt начинает обнаруживаться гибридизацией in situ в какой-то момент между 6 и 10 часами оплодотворения. 13). Недавние эксперименты по трансплантации показали, что Wnt1 и Wnt3 , экспрессируемые в губе бластопора, достаточны для передачи способности осевого организатора аборальным эктодермальным клеткам гаструлы Nematostella (13).Чтобы проверить, необходимы ли эти две сигнальные молекулы для правильного осевого развития и образования энтодермы в агрегатах, мы инъецировали случайные одиночные бластомеры на стадии восьми клеток с плазмидами, управляющими экспрессией Wnt1 и Wnt3 , а затем создали агрегаты из аборальные половины этих инъецированных эмбрионов, когда они достигли стадии средней гаструлы. Несмотря на отсутствие клеток преэнтодермальной пластинки и клеток губы бластопора, эти агрегаты развились в первичные полипы (рис.4 А – С ). Это указывает на то, что Wnt1 и Wnt3 достаточны для восстановления надлежащего формирования зародышевого слоя и оси и индукции самоорганизации эмбриональных агрегатов.

Рис. 4.

Роль передачи сигналов Wnt/β-catenin и BMP во время развития агрегатов. ( A – C ) Формирование оси и сегрегация энтодермы сохранены в 15 из 17 агрегатов, полученных из аборальных половинок гаструл, которые были совместно инъецированы в один бластомер на стадии восьми клеток с помощью плазмид, кодирующих немеченые Wnt1 и Wnt3. промотором EF1α и флуоресцентным индикатором (светящиеся клетки в B ).( D – F ) BMP2/4 Нокдаун приводит к отсутствию в агрегатах морфологически отчетливых осей тела. n = 32. (Шкала: 100 мкм.)

Передача сигналов BMP играет центральную роль в установлении и поддержании второй, направляющей оси тела у Nematostella (24⇓–26). Во время нормального развития начальная радиально-симметричная экспрессия центральных сигнальных компонентов BMP BMP2/4 и Chordin начинает обнаруживаться в бластуле около 14 часов после оплодотворения (13) зависимым от β-катенина образом (рис.S5 А ). В поздней гаструле происходит нарушение симметрии, зависящее от передачи сигналов BMP, в экспрессии BMP2/4 и Chordin , демонстрирующее установление направляющей оси (28). Следовательно, нокдаун morpholino BMP2/4 или Chordin приводит к потере передачи сигналов BMP у эмбрионов и отсутствию направляющей оси (24, 25). Чтобы оценить роль передачи сигналов BMP в самоорганизующихся агрегатах, мы создали агрегаты из эмбрионов на стадии гаструлы, которым инъецировали ранее проверенный морфолино BMP2/4 (24).Поразительно, что агрегаты BMP2/4MO не только были неспособны формировать направляющие оси, как мы и ожидали, но также были сильно затронуты их орально-аборальные оси (рис. 4 D – F ). Уже было показано, что морфолино-нокдаун лигандов BMP влияет на экспрессию многих генов, транскрибируемых в ограниченных доменах вдоль орально-аборальной оси (24, 26, 29), что свидетельствует о возможной обратной связи передачи сигналов BMP на Wnt/β-катенин. –система сигнализации. Мы решили проверить это более подробно на морфантах BMP2/4 и агрегатах морфантов.Хотя экспрессия индукторов орального развития, Wnt1 и Wnt3 , повышалась в транскриптоме морфантной гаструлы BMP2/4 через 24 часа после оплодотворения (29), Wnt1 , Wnt3 , FoxA и Экспрессионные домены Brachyury оказались нормальными в морфантах BMP2/4 на стадии гаструлы через 24 часа после оплодотворения. Напротив, экспрессия всех этих генов оказалась значительно слабее у 2- и 3-дневных морфантных эмбрионов (Fig. S5 B ). Точно так же экспрессия Wnt1 , Wnt3 и Brachyury также была снижена, и ее рестрикция к оральным полюсам была серьезно нарушена в агрегатах BMP2/4MO (рис. S6 А ). Если передача сигналов BMP необходима для поддержания надлежащей экспрессии Wnt1 и Wnt3 , то ее подавление должно подавлять индуктивную способность клеток организатора губ бластопора. В соответствии с этим мы наблюдали сильное снижение способности индуцировать ось губ бластопора, трансплантированных от доноров-морфантов BMP2/4 и Chordin реципиентам дикого типа (рис. S5 C ). Наличие положительной обратной связи передачи сигналов BMP на передачу сигналов Wnt/β-катенина также объясняет наше предыдущее наблюдение, согласно которому, в отличие от позвоночных, инъекция в один бластомер экспрессирующих конструкций Chordin не приводит к образованию эктопических осей тела у Nematostella. .Как это ни парадоксально, анализ экспрессии Frizzled 5/8 в морфантах BMP2/4 и агрегатах морфантов показывает, что снижение экспрессии оральных маркеров Wnt1 , Wnt3 , FoxA и Brachyury не сопровождается расширение аборальной территории характеризуется низкими уровнями передачи сигналов β-катенина, а скорее снижением экспрессии Fz5/8 у более старых морфантов и агрегатов BMP2/4MO (рис. S5 B и S6 B ).

Наши эксперименты показали, что агрегаты эмбриональных клеток морского анемона Nematostella способны восстанавливать зародышевые листки и правильно формировать осевое строение тела. Энтодермальные клетки в агрегатах сохраняют свою энтодермальную идентичность и не могут превращаться в эктодерму, указывая на то, что это раннее решение клеточной судьбы необратимо. Более того, эндодермальные клетки были способны проникать с поверхности агрегата автономно, т. е. в отсутствие ротовых клеток.Однако такие агрегаты оставались твердыми сферами, что указывает на то, что оральные сигналы все еще могут быть необходимы для образования определенного энтодермального слоя. Агрегаты, состоящие исключительно из энтодермальных клеток, не восстанавливают полипы, а превращаются в мезенхимальные клетки. Напротив, эктодермальные клетки были способны превращаться в энтодерму и образовывать нормальные полипы. Осевое формирование паттерна в агрегатах зависит от сигналов Wnt от эктодермы губы бластопора, которая обладает организаторской активностью (13⇓-15). Напротив, клетки, происходящие из аборальной эктодермы, приобретают новую аксиальную идентичность, как только распределяются по всей совокупности.Наши результаты также подчеркивают важность передачи сигналов BMP в поддержании Wnt-зависимой орально-аборальной оси у Nematostella .

Поскольку агрегаты используют тот же набор регуляторов развития, что и нормальные эмбрионы, мы заключаем, что эти гены являются частью самоорганизующейся генной регуляторной сети, обеспечивающей потрясающую пластичность и способность реагировать на еще беспрецедентный контекст развития, такой как отсутствие полости в совокупности, что предотвращает инвагинацию.Чтобы обойти это ограничение, агрегаты морского анемона Nematostella активируют альтернативную траекторию развития. Вместо инвагинации они образуют зародышевые листки путем сочетания отслоения эктодермального слоя; мультиполярная ингрессия клеток энтодермальной пластинки, оказавшихся на поверхности агрегатов после центрифугирования диссоциированных клеток; кавитация массы клеток, находящихся внутри агрегатов. Любопытно, что экспериментально модулированное развитие агрегатов Nematostella напоминает нормальное развитие других книдарий, т.е.е., представители Hydrozoa, которые гаструлируют обычно за счет ингрессии отдельных клеток (30, 31) или расслоения (32, 33) (рис. S7 A ). В отличие от гаструляции у большинства кишечнополостных и у Bilateria, где она происходит в определенном положении по отношению к осям тела эмбриона, деламинация и ингрессия у Hydrozoa могут быть мультиполярными и не связанными с формированием осевого паттерна (32⇓⇓⇓⇓–37). (Рис. S7 A ). При отслоении морулы, когда в результате дробления образуется твердый зародыш без бластоцеля, наружные клетки морулы начинают эпителизироваться и обособляются от внутренней массы клеток, будущей энтодермы, которая затем кавитирует и образует энтодермальный эпителиальный слой.Подобно ситуации во время развития совокупности Nematostella (рис. S7 B – E ), эпителизация эктодермы начинается во многих различных областях по всей моруле, а затем отдельные участки эпителия расширяются и сливаются (32, 33).

Такая пластичность не является уникальной особенностью эмбриональных клеток ранних ветвящихся многоклеточных животных. У морских ежей и морских звезд диссоциированные и реагрегированные клетки эмбрионов на стадии гаструлы точно так же способны восстанавливать свои нормальные планы тела и образовывать личинок.Интересно, что и у иглокожих внутренние клетки агрегатов образуют энтодермальный слой без стадии инвагинации (38⇓⇓–41). Однако, как только внутренние клетки объединяются в эпителий и эмбрион образует полость, целомические мешочки формируются в результате энтероцелического процесса (42), т. е. из выпячиваний стенки кишки. Сравнение агрегатов и нормальных зародышей позволяет предположить, что альтернативные траектории развития легко доступны для организмов, если только они не имеют мозаичного развития с высоким уровнем происхождения.Более того, вполне вероятно, что такая пластичность и способность к регулятивному развитию присутствовали уже на самых ранних стадиях эволюции животных. Так как устойчивость фенотипа способствует эволюционируемости фенотипа (43), способность изменять эмбриональное развитие без вредных эффектов могла способствовать диверсификации траекторий развития, ведущих к формированию планов тела животных.

Стартовый лист лыжных гонок, среда

Среда, мужчины, командный спринт, классический полуфинал, полуфинал 1 1.Норвегия (Эрик Валнес; Йоханнес Хёсфлот Клаэбо). 2. Финляндия (Ииво Нисканен; Йони…

Среда

Мужская сборная

Спринт Классический

Полуфиналы

Полуфинал 1

1. Норвегия (Эрик Валнес; Йоханнес Хёсфлот Клаэбо).

2. Финляндия (Ииво Нисканен; Йони Маки).

3. Франция (Гюго Лапал; Ришар Жув).

4. Британия (Джеймс Клагнет; Эндрю Янг).

5. Чехия (Людек Селлер; Михал Новак).

6. Румыния (Поль Константин Пепене; Рауль Михай Попа).

7. Канада (Антуан Сир; Грэм Ричи).

8. Словения (Вили Црв; Миха Сименц).

9. Беларусь (Александр Воронов; Егор Шпунтов).

10. Южная Корея (Ким Мину; Чон Чонвон).

11. Эстония (Анри Роос; Мартин Химма).

12. Австралия (Фил Беллингем; Сев де Кампо).

13. Литва (Модестас Вайчулис; Таутвидас Строля).

Полуфинал 2

1. РПЦ (Александр Большунов; Александр Терентьев).

2. Италия (Франческо Де Фабиани; Федерико Пеллегрино).

3. Швеция (Уильям Поромаа; Оскар Свенссон).

4. Швейцария (Jonas Baumann; Jovian Hediger).

5. Германия (Альберт Кухлер; Янош Брюггер).

6. США (Бен Огден; Джеймс Клинтон Скунмейкер).

7. Китай (Ван Цян; Шан Цзиньцай).

8. Австрия (Михаэль Феттингер; Бенджамин Мозер).

9. Латвия (Раймо Вигантс; Робертс Слотинс).

10. Польша (Мацей Старега; Камиль Бурый).

11. Украина (Алексей Красовский; Руслан Перехода).

12. Исландия (Снорри Эйтор Эйнарссон; Исак Стиансон Педерсен).

Финал

1. Италия (Франческо Де Фабиани; Федерико Пеллегрино).

2. Норвегия (Эрик Валнес; Йоханнес Хёсфлот Клаэбо).

3. Швеция (Уильям Поромаа; Оскар Свенссон).

4. Франция (Гюго Лапал; Ришар Жув).

5. Швейцария (Jonas Baumann; Jovian Hediger).

6. Финляндия (Ииво Нисканен; Йони Маки).

7. Австрия (Михаэль Феттингер; Бенджамин Мозер).

8. Канада (Антуан Сир; Грэм Ричи).

9. РПЦ (Александр Большунов; Александр Терентьев).

10. США (Бен Огден; Джеймс Клинтон Скунмейкер).

Женская команда

Спринт Классический

Полуфиналы

Полуфинал 1

1. США (Рози Бреннан; Джесси Диггинс).

2. Швейцария (Laurien van der Graaff; Nadine Faehndrich).

3. Словения (Ева Уревц; Анамария Лампич).

4. Германия (Катарина Хенниг; Виктория Карл).

5. Австрия (Тереза Штадлобер; Лиза Унтервегер).

6. Канада (Кэтрин Стюарт-Джонс; Дария Битти).

7. Китай (Чи Чунсюэ; Ли Синь).

8. Украина (Юлия Кроль; Марина Анцибор).

9. Беларусь (Анастасия Кириллова; Анна Каралева).

10.Хорватия (Тена Хаджич, Ведрана Малец).

11. Австралия (Джессика Йетон; Кейси Райт).

12. Турция (Айсенур Думан; Озлем Джерен Дурсун).

13. Латвия (Кития Аузина; Эстере Вольфа).

Полуфинал 2

1. РПЦ (Юлия Ступак; Наталья Непряева).

2. Швеция (Майя Дальквист; Йонна Сундлинг).

3. Финляндия (Кертту Нисканен; Криста Пармакоски).

4. Норвегия (Тирил Уднес Венг; Майкен Касперсен Фалла).

5.Чехия (Катерина Янатова; Петра Хынчикова).

6. Италия (Катерина Ганц; Лючия Скардони).

7. Польша (Изабела Марциш; Моника Скиндер).

8. Франция (Мелисса Гал; Лена Куинтин).

9. Казахстан (Надежда Степашкина; Ксения Шалыгина).

10. Эстония (Мариэль Мерли Пуллес; Кейди Каасику).

11. Южная Корея (Хан Дасом; Ли Ый Джин).

12. Греция (Мария Нтану; Нефели Тита).

13. Бразилия (Жаклин Мурао; Эдуарда Рибера).

14. Литва (Эгле Савицкайте; Иева Дайните).

Финал

1. РПЦ (Юлия Ступак; Наталья Непряева).

2. Германия (Катарина Хенниг; Виктория Карл).

3. Финляндия (Кертту Нисканен; Криста Пармакоски).

4. США (Рози Бреннан, Джесси Диггинс).

5. Швеция (Майя Дальквист; Йонна Сундлинг).

6. Австрия (Тереза Штадлобер; Лиза Унтервегер).

7. Норвегия (Тирил Уднес Венг; Майкен Касперсен Фалла).

8. Швейцария (Laurien van der Graaff; Nadine Faehndrich).

9. Франция (Мелисса Галь; Лена Квинтин).

10. Польша (Изабела Марциш; Моника Скиндер).

Женский волейбольный клуб «ДИНАМО-МЕТАР»